プレートへの細胞播種、細胞のイメージング、最適な細胞の選択、そしてこれらの細胞の単離を、専用の消耗品CytoSort Array 1つで行うことができます。CytoSort Arrayは、MatriGelやCelTakなどのコーティング剤や、ラミニンやフィブロネクチンなどの細胞外マトリックス成分にも対応しており、様々な目的の細胞に合わせて培養環境をカスタマイズすることも可能です。より効率的なワークフローとより良い下流の結果をもたらし、結果あたりのコストを削減します。
- CytoSort Single Array
最も汎用性の高いアレイで、あらゆる用途に適しています。
サイズ:
- 100×100μm マイクロウェル
40,000 CellRafts/Array - 200×200μm マイクロウェル
10,000 CellRafts/Array
- CytoSort Quad Array
4つの独立したリザーバーを持つアレイ。
用途:
- 並行して行う遺伝子編集、クローニングのためのクローン拡大、コロニーの選択
- 多変量処理とさまざまな培地への適用
サイズ:
- 100×100μm マイクロウェル
6,400 CellRafts/リザーバー、アレイ全体で25,600個のCellRafts - 200×200μm マイクロウェル
1,600 CellRafts/リザーバー、アレイ全体で6,400個のCellRafts
- CytoSort HexaQuad™ Array
24個の独立したリザーバーを持つアレイ。
用途:
- ハイスループットCRISPRスクリーニング、クローンの増殖、コロニー選択
- オンアレイでの機能的なアッセイおよび投与の研究
サイズ:
- 100×100μm マイクロウェル
6,400 CellRafts/リザーバー、アレイ全体で153,600個のCellRafts - 200 x 200μm マイクロウェル
1,600 CellRafts/リザーバー、アレイ全体で38,400個のCellRafts
CellRaft® AIR システムによる自動セルクローニングシステム ~細胞のイメージング・識別・分離とCHO細胞への応用例~
[Webinarオンデマンド配信 ] ライブ実施日時:2021/10/28
シングルセルクローニングは単一クローンに由来した細胞株を樹立する手法であり、遺伝子導入した細胞株や抗体産生細胞の樹立などに必須の手法です。代表的なシングルセルクローニング法である限界希釈法やFACSは、大量のプレートや培地などの消耗品が必要になったり、大型かつ高価な機器の購入が必要だったり、あるいは単離後の細胞へのダメージが大きいといった問題点がありました。
Cell Microsystems社で開発されたCellRaft
® AIRシステムは、極小のウェルが無数に並んだアレイを用いることで迅速かつ高い細胞生存率(80-90%)でシングルセル化が行えます。シングルセル化後にアレイ上で細胞を培養可能であり、成長率・クローナリティ・蛍光シグナル強度(3 channel)などから細胞を識別し、任意の細胞コロニーを培養プレートやPCRチューブに素早く単離することが可能です。さらに、数万に及ぶシングルセルの増殖過程は時系列の画像データとして全てアーカイブ化されるので、時を遡って細胞の状態を確認することも可能です。この一連の作業の大部分を自動化することにより、CellRaft
® AIRシステムは極めて効率的なシングルセルのワークフローをお客様に提供します。
本セミナーではCellRaft
® AIRシステムの特長と、CHO細胞を使用したモデルケースについてご紹介します。
※上記画像をクリックいただくと、Vimeoサイトが開きます。お名前等をご入力の上視聴ください。
【 CRISPR 】Automated microraft platform to identify and collect non-adherent cells successfully gene-edited with CRISPR-Cas9Attayek PJ, Waugh JP, Hunsucker SA, Grayeski PJ, Sims CE, Armistead PM, Allbritton NL
Biosens Bioelectron. 2017 May 15;91:175-182. doi: 10.1016/j.bios.2016.12.019
【 CellRaft Features 】Assay and Isolation of Single Proliferating CD4+ Lymphocytes Using an Automated Microraft Array PlatformLaBelle CA, Zhang RJ, Armistead PM, Allbritton NL
IEEE Trans Biomed Eng. 2020 Aug;67(8):2166-2175. doi: 10.1109/TBME.2019.2956081
Automated platform for cell selection and separation based on four-dimensional motility and matrix degradationNowotarski HL , Attayek PJ , Allbritton NL
Analyst. 2020 Apr 7;145(7):2731-2742. doi: 10.1039/c9an02224d
Microraft array-based platform for sorting of viable microcolonies based on cell-lethal immunoassay of intracellular proteins in microcolony biopsiesSmiddy NM, DiSalvo M, Allbritton-King JD, Allbritton NL
Analyst. 2020 Apr 7;145(7):2649-2660. doi: 10.1039/d0an00030b
Identification and isolation of antigen-specific cytotoxic T lymphocytes with an automated microraft sorting system.Attayek PJ, Hunsucker SA, Sims CE, Allbritton NL, Armistead PM.
Integr Biol (Camb). 2016 Dec 5;8(12):1208-1220. DOI:10.1039/c6ib00168h
Array of Biodegradable Microrafts for Isolation and Implantation of Living, Adherent CellsWang Y, Phillips CN, Herrera GS, Sims CE, Yeh JJ, Allbritton NL
RSC Adv. 2013 Jun 28;3(24):9264-9272
Dissolution-guided wetting for microarray and microfluidic devices.Wang Y, Sims CE, Allbritton NL
Lab Chip. 2012 Sep 7;12(17):3036-9. doi: 10.1039/c2lc40330g. Epub 2012 Jul 20
Micromolded arrays for separation of adherent cells.Wang Y, Phillips C, Xu W, Pai JH, Dhopeshwarkar R, Sims CE, Allbritton NL
Lab Chip. 2010 Nov 7;10(21):2917-24. doi: 10.1039/c0lc00186d. Epub 2010 Sep 13
【 Genomics 】Single-cell whole-genome sequencing reveals the functional landscape of somatic mutations in B lymphocytes across the human lifespanZhang L, Dong X, Lee M, Maslov AY, Wang T, Vijg J
Proc Natl Acad Sci U S A. 2019 Apr 16. pii: 201902510. doi: 10.1073/pnas.1902510116
Neurons with Complex Karyotypes Are Rare in Aged Human NeocortexChronister WD, Burbulis IE, Wierman MB, Wolpert MJ, Haakenson MF, Smith ACB, Kleinman JE, Hyde TM, Weinberger DR, Bekiranov S, McConnell MJ
Cell Rep. 2019 Jan 22;26(4):825-835.e7. doi: 10.1016/j.celrep.2018.12.107
Differences between germline and somatic mutation rates in humans and miceMilholland B, Dong X, Zhang L, Hao X, Suh Y, Vijg J
Nat Commun. 2017 May 9;8:15183. doi: 10.1038/ncomms15183
Accurate identification of single-nucleotide variants in whole-genome-amplified single cellsDong X, Zhang L, Milholland B, Lee M, Maslov AY, Wang T, Vijg J.
Nat Methods. 2017 Mar 20. doi: 10.1038/nmeth.4227
Selective single cell isolation for genomics using microraft arrays.Welch JD, Williams LA, DiSalvo M, Brandt AT, Marayati R, Sims CE, Allbritton NL, Prins JF, Yeh JJ, Jones CD.
Nucleic Acids Res. 2016 Sep 30;44(17):8292-301. doi: 10.1093/nar/gkw700. Epub 2016 Aug 16.
Single-Cell CNV Detection in Human Neuronal NucleiWierman M.B., Burbulis I.E., Chronister W.D., Bekiranov S., McConnell M.J.
In: Frade J., Gage F. (eds) Genomic Mosaicism in Neurons and Other Cell Types.
Neuromethods, vol 131. Humana Press, New York, NY (2017). doi.org/10.1007/978-1-4939-7280-7_6
【 Organoids 】A high-throughput platform for stem cell niche co-cultures and downstream gene expression analysis.Gracz AD, Williamson IA, Roche KC, Johnston MJ, Wang F, Wang Y, Attayek PJ, Balowski J, Liu XF, Laurenza RJ, Gaynor LT, Sims CE, Galanko JA, Li L, Allbritton NL, Magness ST
Nat Cell Biol. 2015 Mar;17(3):340-9. doi: 10.1038/ncb3104. Epub 2015 Feb 9
【 Stem Cells 】Automated sensing and splitting of stem cell colonies on microraft arraysDiSalvo M, Smiddy NM, Allbritton NL
APL Bioeng. 2019 Aug 29;3(3):036106. doi: 10.1063/1.5113719
Transferable neuronal mini-cultures to accelerate screening in primary and induced pluripotent stem cell-derived neurons.Niedringhaus M, Dumitru R, Mabb AM, Wang Y, Philpot BD, Allbritton NL, Taylor AM
Sci Rep. 2015 Feb 10;5:8353. doi: 10.1038/srep08353
A high-throughput platform for stem cell niche co-cultures and downstream gene expression analysis.Gracz AD, Williamson IA, Roche KC, Johnston MJ, Wang F, Wang Y, Attayek PJ, Balowski J, Liu XF, Laurenza RJ, Gaynor LT, Sims CE, Galanko JA, Li L, Allbritton NL, Magness ST
Nat Cell Biol. 2015 Mar;17(3):340-9. doi: 10.1038/ncb3104. Epub 2015 Feb 9