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N-グリカン迅速遊離・標識キット Gly-X

N-グリカン迅速遊離・標識キット Gly-X ™

次世代のN-グリカン調製プラットフォーム

Gly-Xは、次世代のN-グリカンサンプル調製プラットフォームです。

溶液中での脱グリコシル化反応と蛍光色素標識、吸引によるクリーンアップステップにより、従来よりも大幅に操作時間を短縮します。新規開発の蛍光色素InstantPCをはじめとする各種蛍光色素で標識されたN-グリカンサンプルは、UHPLCやLC/MS、CEでの糖鎖解析が可能です。

N-グリカンの脱グリコシル化・標識、余分な色素や変性剤の除去に必要な試薬・プレート等がセットになっています。




特長

  • 簡便・迅速:1~ 2.5 時間以内に操作が完了
    • InstantPC、InstantAB キット:1 時間以内
    • 2-AB Express、APTS Express キット:2.5 時間以内

  • 1 サンプルあたり最⼤ 40μg の糖タンパク質を脱グリコシル化・標識

  • 標識色素ごとに個別のキットがあります。

    標識色素ラインナップ:
    • InstantPC [新規開発色素]
    • InstantAB
    • 2-AB (2-Aminobenzamide)
    • APTS (8-aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid)

    ※キット内の構成品を個別にご購入いただくことも可能です。

  • ワークフロー概略
    最⼤40μgの糖タンパク質のN-Glycanase®
    (PNGase F)による
    脱グリコシル化(5分)
    ⾊素で標識(1分)
    ※2-AB Express、
    APTS Expressは
    1時間
    クリーンアップ
    (15〜20分)
    UHPLC・LC/MS、CE等

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標識⾊素・キット 選択ガイド

標識色素 Λ Ex/ Em (nm) 標識時間 用途 特色 キット

InstantPC
285 / 345 1分 LC/MS LC/MS に最適。⾮常に強いFLR・MS シグナル検出が可能Instant ⾊ 素により⼤幅な標識時間の短縮。 Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(InstantPC)

InstantAB
278 / 344 1分 LC-FLR LC-FLR に適する。HILIC 溶出プロファイルにおいて2-AB に類似。 Instant ⾊素により⼤幅な標識時間の短縮。 Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(InstantAB)

2-AB
360 / 428 > 1時間 LC-FLR LC-FLR に適する。 Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(2-AB Express)

APTS
473 / 520 > 1時間 CE 電気泳動による分離に適する。 Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(APTS Express)


各⾊素の反応機構



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Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(InstantPC)

ProZyme社が新規開発した、InstantPC色素によるN-グリカン標識が可能なキットです。

InstantPCは従来のProcainamideや2-AB (2-アミノベンズアミド)と⽐較して蛍光輝度が⾼く、InstantPC標識したN-グリカンサンプルは、LC/MSにおいて⾮常に⾼いFLR・MSシグナル検出が可能になります。


型式:
  • GX96-IPC (96 サンプル⽤)
  • GX24-IPC (24 サンプル⽤)

    ※キットでのご購入時 輸送温度条件:冷蔵
InstantPC⾊素の構造(上)とN-グリカンとの反応機構。InstantPCはProcaineの活性型で、PNGase Fにより遊離したglycosilamineを標識します。


キット構成

  • Gly-X 脱グリコシル化・InstantPC 標識モジュール
    型式:GX96-201PC (96 サンプル⽤) / GX24-201PC (24 サンプル⽤)

    糖タンパク質の脱グリコシル化および遊離したN-グリカンのInstantPC ⾊素標識の段階に必要なプレート・試薬のセットです。

      輸送時温度条件:冷蔵

    No. 構成品目 保存温度条件 毒劇物指定
    脱グリコシル化モジュール ※保存温度条件:冷蔵(2-8℃)
    1 Gly-X 脱グリコシル化プレート 常温~冷蔵(2-30℃)
    2 Gly-X N-Glycanase 冷蔵(2-8℃)
    3 Gly-X 消化バッファー 冷蔵(2-8℃) 医薬用外毒物を含む
    4 Gly-X 変性剤 冷蔵(2-8℃)
    標識モジュール [型式:GX96-101(96-ct)・GX24-101(24-ct)] ※保存温度条件:冷凍(-20℃/冷暗所)
    5 InstantPC色素 冷凍(-20℃、感光性)
    6 InstanPC色素溶媒 冷凍(-20℃、乾燥した環境)※使用前に室温に戻す
  • Gly-X InstantPC クリーンアップモジュール
    型式:GX96-102 (96 サンプル⽤)
    ※24 サンプル⽤キットにも96 サンプル⽤モジュールが含まれます。

    InstantPC⾊素標識後のサンプルから、余分な⾊素や変性剤を除去する段階に必要な試薬・プレート等のセットです。

      輸送時温度条件:常温

    No. 構成品目 保存温度条件
    1 Gly-X クリーンアッププレートA 常温(15-30℃)
    2 Gly-X InstantPC 溶出剤 常温
    3 Gly-X バキュームマニホールド用廃液トレイ 常温(15-30℃)
    4 Gly-X 使用済ウェルシーリングキャップ黒 (クリーンアッププレート用)
    5 Gly-X コレクションプレート
    6 プレートシーリングフィルム
    7 保存用シーリングホイル


    ※脱グリコシル化・標識、クリーンアップの過程には、キット構成品以外の器材・試薬が必要です。

    • 96 ウェルサーマルサイクラー または ヒートブロックx2 (90℃と50℃にセットする)
      (例:GlycoPrep Heater(ProZyme WS0271)x 2 個(VWR 13259-260 Modular Heating Blocks 使⽤の場合)
    • MultiScreen HTS バキュームマニホールド(Merck Millipore, MSVMHTS00)
    • バキュームポンプ(Merck Millipore WP6211560, 110 V)
    • Gly-X バキュームマニホールドスぺーサー (GX100)
    • ギ酸 MS グレード (Fisher A117-50 推奨)
    • アセトニトリル(ACN) MS グレード (Fisher A955-4 推奨)
    • VWR 10kDa Centrifugal Filters (82031-348) (オプション)





LC-FLR (A)、MS (B) シグナルの⽐較:
等量の糖タンパク質サンプルから調製したN- グリカンを、InstantPC、RapiFluor-MS、Procainamide、2-AB で標識し、UHPLC で測定した。バーはG0FN- グリカンのピークエリアを⽰す。

キット構成品 ご注文型式・関連品・グリカンライブラリ・スタンダード一覧


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Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(InstantAB)

ProZyme 社オリジナルの蛍光⾊素、InstantAB によるN-グリカン標識が可能なキットです。標識したN- グリカンサンプルは、LS-FLRに適しています。

Instant ⾊素構造により、標識時間の⼤幅な短縮を実現しています。HILIC 溶出プロファイルにおいて2-AB に類似したプロファイルを⽰します。


型式:GX96-IAB (96 サンプル⽤)

※キットでのご購入時 輸送温度条件:冷蔵
InstantABの構造▲     


キット構成

  • Gly-X 脱グリコシル化・InstantAB 標識モジュール
    型式:GX96-202IAB (96 サンプル⽤)

    糖タンパク質の脱グリコシル化および遊離したN- グリカンの
    InstantAB⾊素標識の段階に必要なプレート・試薬のセットです。

      輸送時温度条件:冷蔵


    No. 構成品目 保存温度条件 毒劇物指定
    脱グリコシル化モジュール ※保存温度条件:冷蔵(2-8℃)
    1 Gly-X 脱グリコシル化プレート 常温~冷蔵(2-30℃)
    2 Gly-X N-Glycanase 冷蔵(2-8℃)
    3 Gly-X 消化バッファー 冷蔵(2-8℃) 医薬用外毒物を含む
    4 Gly-X 変性剤 冷蔵(2-8℃)
    標識モジュール [型式:GX96-501] ※保存温度条件:冷凍(-20℃/冷暗所)
    5 InstantAB色素 冷凍(-20℃、感光性)
    6 InstantAB色素溶媒 冷凍(-20℃、乾燥した環境)※使用前に室温に戻す
  • Gly-X InstantAB クリーンアップモジュール
    型式:GX96-502 (96 サンプル⽤)

    InstantAB⾊素標識後のサンプルから、余分な⾊素や変性剤を除去する段階に必要な試薬・プレート等のセットです。

      輸送時温度条件:常温

    No. 構成品目 保存温度条件
    1 Gly-X クリーンアッププレートA 常温(15-30℃)
    2 Gly-X InstantPC 溶出剤 常温
    3 Gly-X バキュームマニホールド用廃液トレイ 常温(15-30℃)
    4 Gly-X 使用済ウェルシーリングキャップ黒 (クリーンアッププレート用)
    5 Gly-X コレクションプレート
    6 プレートシーリングフィルム
    7 保存用シーリングホイル


    ※脱グリコシル化・標識、クリーンアップの過程には、キット構成品以外の器材・試薬が必要です。

    • 96 ウェルサーマルサイクラー または ヒートブロックx2 (90℃と50℃にセットする)
      (例:GlycoPrep Heater(ProZyme WS0271)x 2 個(VWR 13259-260 Modular Heating Blocks 使⽤の場合)
    • MultiScreen HTS バキュームマニホールド(Merck Millipore, MSVMHTS00)
    • バキュームポンプ(Merck Millipore WP6211560, 110 V)
    • Gly-X バキュームマニホールドスぺーサー (GX100)
    • ギ酸 MS グレード (Fisher A117-50 推奨)
    • アセトニトリル(ACN) MS グレード (Fisher A955-4 推奨)
    • VWR 10kDa Centrifugal Filters (82031-348) (オプション)




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Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(2-AB Express)

糖鎖研究に伝統的に使⽤されてきた⾊素である、2-AB (2-アミノベンズアミド) によるN- グリカン標識が可能なキットです。標識したN- グリカンは、LC-FLRに適しています。


型式:
  • GX96-2AB (96 サンプル⽤)
  • GX24-2AB (24 サンプル⽤)

    ※キットでのご購入時 輸送温度条件:冷蔵

2-AB標識されたN-グリカン▲     


キット構成

  • Gly-X 2-AB 脱グリコシル化・標識モジュール
    型式:GX96-401AB (96 サンプル⽤)

    糖タンパク質の脱グリコシル化および遊離したN-グリカンの2-AB⾊素標識の段階に必要なプレート・試薬のセットです。


      輸送時温度条件:冷蔵


    No. 構成品目 保存温度条件 毒劇物指定
    脱グリコシル化モジュール ※保存温度条件:冷蔵(2-8℃)
    1 Gly-X 脱グリコシル化プレート 常温~冷蔵(2-30℃)
    2 Gly-X N-Glycanase 冷蔵(2-8℃)
    3 Gly-X 消化バッファー 冷蔵(2-8℃) 医薬用外毒物を含む
    4 Gly-X 変性剤 冷蔵(2-8℃)
    標識モジュール [型式:GX96-401] ※保存温度条件:冷凍(-20℃/冷暗所)
    5 2-AB色素溶液 冷凍(-20℃、乾燥した環境、感光性)
    6 2-AB還元剤 冷凍(-20℃、乾燥した環境、感光性) 医薬用外毒物を含む
    7 2-AB触媒 冷凍(-20℃、乾燥した環境)
    8 2-AB Finishing溶液 冷凍~冷蔵(-20~8℃)
  • Gly-X 2AB クリーンアップモジュール
    型式:GX96-402 (96 サンプル⽤)
    ※24 サンプル⽤キットにも96 サンプル⽤モジュールが含まれます。

    2-AB⾊素標識後のサンプルから、余分な⾊素や変性剤を除去する段階に必要な試薬・プレート等のセットです。

      輸送時温度条件:常温

    No. 構成品目 保存温度条件
    1 Gly-X クリーンアッププレートA 常温(15-30℃)
    2 Gly-Xロードプレート
    3 Gly-X バキュームマニホールド用廃液トレイ 常温
    4 Gly-X 使用済ウェルシーリングキャップ黒 (クリーンアッププレート用) 常温(15-30℃)
    5 Gly-X コレクションプレート
    6 プレートシーリングフィルム
    7 保存用シーリングホイル
    8 ヒートブロック用カバーフィルム 常温


    ※脱グリコシル化・標識、クリーンアップの過程には、キット構成品以外の器材・試薬が必要です。

    • 96 ウェルサーマルサイクラー または ドライ・ブロックヒーターx2 (90℃と50℃にセットする)
      推奨:コンパクトデジタル式ドライバス/ ブロックヒーター (Thermo Scientific #88871001 )
    • 蓋付ドライ・ブロックヒーター(75℃にセットする)
      推奨:コンパクトデジタル式ドライバス/ ブロックヒーター (Thermo Scientific #88871001)、
              Gly-X 2-AB スターターパック (GX400) に含まれる蓋、コンパクトデジタル式ドライバスアクセサリ
              (Thermo #88871111) を使⽤
    • Gly-X バキュームマニホールドスぺーサー
      (GX100 またはGly-X 2-AB スターターパック(GX400) に含まれる)
    • MultiScreen HTS バキュームマニホールド(Merck Millipore MSVMHTS00)
    • バキュームポンプ(Merck Millipore WP6211560, 110 V)
    • DI ⽔
    • アセトニトリル(ACN) MS グレード(Fisher A955-4 推奨)
    • VWR 10kDa Centrifugal Filters (82031-348) ( オプション)


    キット構成品 ご注⽂型式・関連品・グリカンライブラリ・スタンダード一覧


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Gly-X N-グリカン迅速遊離・標識キット(APTS Express)

糖鎖研究に伝統的に使⽤されてきた⾊素である、APTS (8-aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid) によるN- グリカン標識が可能なキットです。標識したN- グリカンは、CE に適しています。


型式:
  • GX96-APTS (96 サンプル⽤)
  • ※キットでのご購入時 輸送温度条件:冷蔵

APTS標識されたN-グリカン▲     


キット構成

  • Gly-X APTS 脱グリコシル化・標識モジュール

    糖タンパク質の脱グリコシル化および遊離したN-グリカンのAPTS色素標識の段階に必要なプレート・試薬のセットです。


      輸送時温度条件:冷蔵


    No. 構成品目 保存温度条件 毒劇物指定
    脱グリコシル化モジュール ※保存温度条件:冷蔵(2-8℃)
    1 Gly-X 脱グリコシル化プレート 常温~冷蔵(2-30℃)
    2 Gly-X N-Glycanase 冷蔵(2-8℃)
    3 Gly-X 消化バッファー 冷蔵(2-8℃) 医薬用外毒物を含む
    4 Gly-X 変性剤 冷蔵(2-8℃)
    標識モジュール [型式:GX96-601] ※保存温度条件:冷凍(-20℃/冷暗所)
    5 APTS色素溶液 冷凍(-20℃)
    6 APTS還元剤 冷凍(-20℃) 医薬用外毒物を含む
    7 APTS触媒 冷凍(-20℃)
    8 APTS Finishing溶液 冷凍~冷蔵(-20~8℃)
  • Gly-X APTS クリーンアップモジュール
    型式:GX96-602 (96 サンプル⽤)

    APTS⾊素標識後のサンプルから、余分な⾊素や変性剤を除去する
    段階に 必要な試薬・プレート等のセットです。

      輸送時温度条件:冷蔵(2-8℃)

    No. 構成品目 保存温度条件
    1 Gly-X クリーンアッププレートB 常温
    2 Gly-X APTS クリーンアップ溶液濃縮物
    3 Gly-X コレクションプレートB
    4 Gly-X バキュームマニホールド用廃液トレイ
    5 Gly-X 使用済ウェルシーリングキャップ黒 (クリーンアッププレート用)


    ※脱グリコシル化・標識、クリーンアップの過程には、キット構成品以外の器材・試薬が必要です。

    • ドライ・ブロックヒーターx2 または ドライ・ブロックヒーターx1 + 96ウェルサーマルサイクラー
      推奨:コンパクトデジタル式ドライバス/ ブロックヒーター (Thermo Scientific #88871001 )
      ※ドライ・ブロックヒーターの1つは96ウェルサーマルサイクラーで代替可能。変性と脱グリコシル化のステップをサーマルサイクラーでも行うことができる。
    • Gly-X APTS Expressヒートブロック (GX500)
      標識ステップで使用
    • Gly-X ヒーターリッド (GX600)
    • MultiScreen HTS バキュームマニホールド(Merck Millipore MSVMHTS00)
    • バキュームポンプ(Merck Millipore WP6211560, 110 V)
    • DI ⽔
    • アセトニトリル(ACN) MS グレード(Fisher A955-4 推奨)
    • VWR 10kDa Centrifugal Filters (82031-348) ( オプション)



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この製品のメーカー

  • Agilent Technologies

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