生細胞を用いた機能的代謝計測のゴールドスタンダード：
Seahorse XF 技術をより身近に。
細胞外フラックスアナライザーXFp は、Agilent Technologies(旧Seahorse Bioscience)社が開発する世界最先端の細胞代謝測定機器の最新モデルです。従来モデルと比較し、コンパクトな設計で、個々の研究室の設置に最適です。細胞の主要なエネルギー代謝経路を非侵襲的に高感度測定する機能は、従来通りになります。
ゲノムまたはプロテオミクス・データを検証するための対比較試験や、患者由来および他の希少なサンプルを用いた代謝機能・表現型の評価に最適です。また、初代細胞・接着細胞・浮遊細胞を含む様々な細胞種を利用して計測を行うことができます。従来モデルよりも僅かなコストで機能的な代謝データを提供することが可能です。
特長
- 自動計測：
細胞を専用のミニプレート上で培養し、
本体にセットするだけで、計測は自動的に行われます。 - 1ウェルにつき最大4 種類の化合物を インジェクション可能：
センサーカートリッジには、化合物等を充填できるインジェクションポートが装備されています。
設定したプロトコルに従い、１ウェルにつき最大4 種類の化合物をインジェクション可能です。 - コンパクトでユーザーフレンドリーなベンチトップ設計
- 合理化されたワークフローにより、迅速なアッセイを支援
- ラベルフリー・無侵襲計測：
放射性同位体を使用せず、細胞を傷つけることなく生きた状態で計測するため、計測後の細胞を他の実験にも使用可能です。 - 装置内部を37℃にインキュベーション可能：
細胞の生理機能を維持するため、温度調節システムが装置の内部環境を37℃に維持します。
PAIRWISE COMPARISONS —対比較
PHENOTYPING —表現型のタイピング
PATIENT-DERIVED SAMPLES —患者由来サンプル | | 
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3種類の標準的な XF アッセイ
細胞の2 つのエネルギー代謝： ミトコンドリア呼吸≒ 酸素消費速度(OCR)
解糖系≒ 細胞外酸性化速度(ECAR) を同時に計測。
XF解糖ストレス試験(解糖)
 | | XFミトストレス試験(ミトコンドリア呼吸) |
| XF解糖ストレス試験プロファイルは、解糖能の主要な3つの指標：グルコース代謝・解糖能・解糖予備能を示します。 | | XF ミトストレス試験プロファイルは、ミトコンドリア機能の主要な指標：基礎呼吸・ATP産生・プロトンリーク・最大呼吸・予備呼吸能を示します。 |
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XFフェノグラム(代謝スイッチング)
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XFフェノグラムは、2つの条件下での、細胞代謝の状態を相対的に描写 します。代謝スイッチングの例には、ワールブルク効果・クラブツリー効果・パスツール効果を含みます。例えばOCR・ECAR の計測時、細胞の好気呼吸が亢進した場合、エネルギー代謝プロファイルはベースラインより左上の領域に、解糖が亢進した場合はベースラインより右下の領域にプロファイルされます。 |
主要なエネルギー代謝経路 【解糖・ミトコンドリアによる好気呼吸】 解糖
細胞内に取り込まれたグルコースを細胞質でピルビン酸に分解する過程でATPを産生し、嫌気的な条件下では細胞外に乳酸を排出する経路です。この経路では、細胞外に排出される乳酸に由来する水素イオンによって、細胞外のpHが酸性に傾きます。 | | ミトコンドリア呼吸
TCA サイクルで得られたNADH2+ 等の電子を、ミトコンドリア内膜上の酵素間で伝達し、ATPを大量に産生します。この過程で酸素が消費されます。 |
細胞の酸素消費を酸素消費速度[ OCR : Oxygen Consumption Rate(pmol/min)]、細胞外に排出される水素イオン濃度の変化を細胞外酸性化速度[ ECAR:Extracellular Acidification Rate(mpH/min ) ]として、フォトルミネッセンス法により検出、指標とすることにより、細胞レベルのエネルギー代謝状態を評価します。
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製品原理
革新的で信頼性の高い Seahorse XF 技術：
半閉鎖的微小環境により実現される高い感度・精度
特許取得済の独自技術： 半閉鎖的微小環境
ミトコンドリア呼吸と解糖の活性評価は、「半閉鎖的微小環境」と、「蛍光センサー(O2 とpH センサー) のクエンチング現象」を利用して行われます。 | 
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「半閉鎖的微小環境」
微小環境は、右図のような専用のプレートと専用のカートリッジにより、形成されます。この空間の容量は2uL と非常に小さく、解析培地中の細胞によるわずかな酸素消費、酸性化(pH 変化)を捉える重要な技術です。Agilent Technologies(旧Seahorse Bioscience)社はこの技術に特許を取得しています。
「蛍光センサーのクエンチング現象」
O2 とpH を測定するための蛍光センサーが、専用のカートリッジの先端に固定されています。計測時には、右図のようにカートリッジは降下し、解析培地に浸漬します。蛍光強度の測定より、解析培地中の酸素濃度(O2)、酸性化(pH)を算出します。
O2 センサー: 励起: 532nm、検出: 650nm
pH センサー: 励起: 470nm、検出: 530nm
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化合物のインジェクションが可能
センサーカートリッジに組み込まれた専用のポートより、最大4 種類までの化合物を、順にそれぞれのウェル内にインジェクションすることができます。
それぞれの化合物に対するサンプルの用量-反応や、作動薬や拮抗薬の反応、代謝経路の変動解析を可能にします。各インジェクションポートの容量は、25µLです。 | |  |
設定したプロトコルに従い、各インジェクションポートにセットした化合物が空気圧によりウェルにインジェクションされ、センサーカートリッジが上下することで、化合物が攪拌されます。 | | 
XFp 用ミニプレートのウェル割当て
対比較試験例：コントロール v.s. 患者モデル
野生型 v.s. ノックアウト、健常 v.s. 疾患
薬剤処理 v.s. 無し |
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アプリケーション
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ソフトウェア
XFp は直感的な操作が可能です。本体フロント部に設置された大きなタッチスクリーンにより、
簡便にアッセイを進めることができます。
※画像をクリックして拡大画像をご覧いただけます。
Wave Desktop ソフトウェアの利用が可能
XFe モデルのWave ソフトウェアと互換性があります。Wave ソフトウェアを利用することで、より詳細な解析を行うことができ、解析結果のレポートをWord やPDF 形式で出力可能です。
デスクトップPCまたはノートPCにインストールすることができます。
・利用可能なOS:
Windows 7 / 8.1 / 10
Mac OS w Parallels 12 + Win 7 / 10
・利用可能なExcel バージョン:
Windows： Excel 2010 / 2013 / 2016
Mac OS + Parallels： Excel 2011 / 2016 | |  |
XF STRESS TEST REPORT GENERATORS
ミトストレス試験や解糖ストレス試験のレポートを作成するExcel マクロツールです。ストレス試験の折れ線グラフデータ から、各指標(予備呼吸能、予備解糖能など)を計算し、棒グラフデータを自動作成します。 |
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キット・消耗品
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仕様
細胞外フラックスアナライザーXFp 本体仕様 | ご注文型式 | XFp |
| 装置寸法 | （W）30.3×（D）56.8×（H）43.0 (cm) |
| 重量 | 14.7 （kg） |
| 電源要件 | 100-120/200-240VAC, 6A/3A, 60/50Hz |
| 同時計測項目 | OCR：酸素消費速度・ECAR：細胞外酸性化速度 |
| アッセイ・フォーマット | 専用ミニプレート中の生細胞 |
| アッセイ・サンプル数 | 6ウェル |
| インジェクションポート | 1ウェルあたり４個（各25µL） |
| アッセイ・実行容量 | 150-275µL／ウェル |
| 必要サンプル数 | 10K－500K 細胞／ウェル |
| 専用ミニプレート素材 | 組織培養処理済ポリスチレン |
| 装置コントローラー | 一体型タッチスクリーン・インターフェース、
USB／イーサネットポート |
| 温度制御範囲 | 16～40℃ (XFp 1.1) |
OS・制御ソフトウェア
| OS：Win7 Embedded
制御ソフトウェア：XFp 1.1 |
本体付属品：
・XFp本体
・FluxPak-XFp用x 1セット
・XFp用Phenotypeキット
※XF用DMEM基礎培地は付属しません。
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※外観及び規格は予告なく変更することがございますので予めご了承ください。
※本ページに記載の製品は、すべて研究・実験用です。
人・動物の診断あるいは治療等の臨床用途に使用することはできません。
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Agilent Technologies(旧Seahorse Bioscience)社 eSeminarのご案内
細胞外フラックスアナライザーXFシリーズを用いた最新の知見・事例が発表される、Web上でのセミナー：Webinar(ウェビナー)をオンデマンド視聴いただけます。
下記、Agilent Technologies(旧Seahorse Bioscience)社Webサイトにアクセスし、Product Lineボタンをクリック、Cell Analysis (Seahorse)を選択いただくと、 XF関連のWebinar一覧が表示されます。
希望のWebinar詳細を表示し、View On-Demand Webinarをクリック、ご連絡先等を入力頂くと、視聴することができます。
是非ご利用下さい。
http://www.agilent.com/en-us/training-events/eseminars ページの先頭に戻る